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ELISA這些常見實(shí)驗(yàn)方法的優(yōu)缺點(diǎn)

2019-04-15 [4361]

ELISA實(shí)驗(yàn)是科研人員常常用到的實(shí)驗(yàn)辦法。很多人覺得ELISA很簡(jiǎn)單,其實(shí)不然。今天小編就帶我們了解下ELISA實(shí)驗(yàn)的原理和常見辦法。   
 實(shí)驗(yàn)原理
  1.包被:抗原/抗體,固相化
  2.反響: 1)待測(cè)抗體/抗原; 2)酶標(biāo)抗原/抗體
  3.洗刷:使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的分別
  4.底物顯色:定性/定量剖析 
   常用辦法
  1.間接法
  檢測(cè)抗體常用的辦法, 首要用于對(duì)病原體抗體的檢測(cè)。
  優(yōu)勢(shì):二抗能夠加強(qiáng)信號(hào),并且有多種選擇能做不同的測(cè)定剖析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保存它多的免疫反響性。
  缺陷:交互反響發(fā)作的機(jī)率較高
  2.雙抗體夾心法
  檢測(cè)大分子抗原常用的辦法。
  優(yōu)勢(shì):高活絡(luò)、高專一性,抗原無(wú)須事前純化。
  缺陷:抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。
  3.競(jìng)爭(zhēng)法
  檢測(cè)小分子半抗原(藥物、激素等)。
  優(yōu)勢(shì):可適用比較不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
  缺陷:整體的敏感性和專一性都較差。 

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