在歷史的進(jìn)化過(guò)程中被自然選擇清除掉；還有一部分微生物會(huì)對(duì)人體造成傷害，但卻不會(huì)導(dǎo)致宿主出現(xiàn)非常嚴(yán)重的癥狀，更不會(huì)導(dǎo)致宿主迅速死亡，于是就被留存下來(lái)，與人類一起進(jìn)化。有些微生物在進(jìn)化過(guò)程中，些錯(cuò)誤的結(jié)果.引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：標(biāo)本因素；試劑因素；操作因素.
樣品稀釋 一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過(guò)大量試驗(yàn)確定,以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性.酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽(yáng)性.
試劑盒平衡 后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗(yàn)的均一性.加樣是一項(xiàng)很重要的步驟.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,ELISA試劑盒不可濺出和產(chǎn)生氣泡.加樣太快,無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附.溫育是ELISA試劑盒測(cè)定中影響測(cè)定成敗zui為關(guān)鍵的一個(gè)因素.ELISA作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間.一種生物或生理活性物質(zhì)，ELISA試劑盒只要有辦法得到其特異的抗體，就可以建立這種物質(zhì)的酶聯(lián)免疫測(cè)定方法。
    詳細(xì)的試驗(yàn)不僅有堅(jiān)固的理論也要實(shí)踐。理論是實(shí)踐的基礎(chǔ)，實(shí)踐是理論的運(yùn)用。但終究選用什么，要依據(jù)試驗(yàn)詳細(xì)來(lái)實(shí)踐。在做ELISA試劑盒試驗(yàn)時(shí)，包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保留抗原很重要。ELISA試劑盒而封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。因此包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來(lái)包。
    ELISA試劑盒標(biāo)本檢測(cè)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：
血清標(biāo)本：注意避免溶血；標(biāo)本應(yīng)在新鮮時(shí)檢測(cè)；標(biāo)本體積：100微升×檢測(cè)指標(biāo)種類，如需做復(fù)孔，標(biāo)本則兩倍收集。
    稀釋度：對(duì)于作某一具體指標(biāo)來(lái)說(shuō)，ELISA試劑盒事先做好系列稀釋度的指標(biāo)測(cè)定，得出實(shí)驗(yàn)有意義的    稀釋度，然后選擇一個(gè)的稀釋度測(cè)定即可；ELISA試劑盒樣本存儲(chǔ)：當(dāng)天要檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缧柚芷谑占瘶?biāo)本，標(biāo)本則應(yīng)及時(shí)    分裝后于-20℃或-70℃條件保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí)，-20℃可保存1    個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。激素類標(biāo)本需添加抑肽酶；
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